شناسایی آنتی ژن اختصاصی کیست هیداتیک توسط روش وسترن بلاتینگ به منظور کاربرد تشخیصی
Authors
Abstract:
چکیده زمینه و هدف: با توجه به اهمیت بیماری هیداتیدوز در جمعیتهای انسانی و دامی، بررسی حاضر با هدف شناسایی آنتیژن تشخیصی کیست هیداتیک با استفاده از روش ایمونوبلاتینگ انجام گرفت. روش بررسی: بدین منظور بعد از تهیه کیست هیداتیک گوسفندی، چهار نوع آنتیژن مایع خام، مایع جوشانده، آنتیژن هموژنیزه پروتواسکولکس و آنتیژن دیواره کیست هیداتیک تهیه گردید. نمونههای سرمی مثبت و عاری از آلودگی در بازرسی کشتارگاهی تهیه شد. الکتروفورز پادگنها توسط روش (SDS-PAGE) با استفاده از سیستم ژل ناپیوسته با ژل جداکننده به غلظت 12% و ژل متراکمکننده به غلظت 5% در مجاورت نشاندار با وزن مولکولی مشخص صورت گرفت. در استفاده از روش وسترن بلاتینگ برای شناسایی پادگن اختصاصی، یک ورقه از غشا نیتروسلولز بر روی ژل انتقال یافت و تحت الکتروفورز قرار گرفت. بعد از انتقال پروتئینها به غشا نیتروسلولز از شیر خشک بدون چربی بعنوان بافر مسدودکننده و سپس بترتیب از آنتیبادی اولیه و ثانویه و از سوبسترای دی آمینو بنزیدین جهت مشخص شدن باندهای اختصاصی استفاده شد. یافتهها: بررسی نتایج الگوی الکتروفورتیک چهار آنتیژن تهیه شده از کیست هیداتیک نشان داد در آنتیژن خام مایع کیست 9 باند پروتئینی از 14 تا بیش از 116 کیلو دالتون وجود دارد که در بین آنها چهار باند با وزن مولکولی 18، 23، 40 و 64 کیلو دالتون مشخصتر و مشترک با پادگن مایع جوشانده هستند. در الکتروفورز آنتیژن دیواره 9 باند از 14 تا بیش از 116 کیلو دالتون و در پروتواسکولکس 10 باند پروتئینی با وزن مولکولی بیشتر از 35 کیلو دالتون وجود داشت. نتیجهگیری: در ایمونوبلاتینگ آنتیژن مایع خام یک باند پروتئینی با وزن مولکولی 35 و در آنتیژن دیواره کیست 3 باند 30، 33 و 46 کیلو دالتون بعنوان آنتیژنهای اختصاصی شناسایی شدند. کلید واژهها: کیست هیداتیک، آنتیژن، وسترن بلاتینگ. وصول مقاله: 1/5/88 اصلاح نهایی: 15/6/88 پذیرش مقاله: 19/6/88
similar resources
بررسی ارزش تشخیصی آنتی ژنB و آنتی ژن پروتواسکولکس کیست هیداتیک با استفاده از روش دات بلاتینگ
Introduction & Objective : Hydatidosis, a disease caused by the cestod helminth echinococcus granulosus, is one of the most important parasitic zoonosis in man and a variety of animals. Sensitive and reliable serologic methods are necessary to confirm the diagnosis. In this study, Ag B and Psc Ag were purified as two specific parasitic antigens and evaluated by Dot blotting used on the serum of...
full textبررسی ارزش تشخیصی آنتی ژنb و آنتی ژن پروتواسکولکس کیست هیداتیک با استفاده از روش دات بلاتینگ
مقدمه و هدف : بیماری کیست هیداتیک یکی از مهمترین زئونوزهای انگلی است که در مناطق مختلف دنیا از جمله ایران شیوع دارد. استفاده از روش های سرولوژیکی که بتواند با حساسیت و ویژگی بالا یی در تشخیص هیداتیدوز بکار رود ارزشمند می باشد. از این رو در این پژوهش ، آنتی ژن b و آنتی ژن پروتواسکولکس بعنوان دو آنتی ژن اختصاصی انگل، تخلیص شده و سپس با تست دات بلاتینگ با سرم بیماران هیداتیدوزی و غیر هیداتیدوزی مو...
full textمطالعه وسترن بلاتینگ آنتی ژنهای پروتئینی سوماتیک فوزاریوم سولانی
چکیده مقدمه: الگوی وسترن بلاتینگ آنتی ژنهای پروتئینی عصاره های سوماتیک قارچها در تشخیص گونه و سویه های آنها مفید بوده و می تواند کمک با ارزشی در تشخیص عامل عفونت باشد. این مطالعه به منظور تعیین الگوی آنتی ژنهای پروتئینی عصاره سوماتیک فوزاریوم سولانی انجام شد. مواد و روش ها : در این مطالعه سویه 7419 UAMH و 3317 UAMH فوزاریوم سولانی که اولی از بیمار و دومی از هوا جدا شده بود جهت بررسی الگوی آ...
full textمقایسه آزمایش پوستی کازونی با دو آنتی ژن : مایع کیست و آنتی ژن تهیه شده از اسکولکس کیست هیداتیک
full text
بررسی اثر آنتی ژن های پروتواسکولکس کیست هیداتیک بر پیشگیری از رشد کیست های هیداتیک ثانویه
چکیده: مقدمه و هدف: کیست هیداتیک در احشاء داخلی انسان و بعضی حیوانات مستقر می شود و یک مشکل بهداشتی ـ دامپزشکی و اقتصادی در مناطق آلوده تلقی می گردد. هنگامی که این کیست پاره می شـــود پروتواسکولکس های داخل آن ممکن است به خارج راه یافته و داخل بافت میزبان ایجاد کیست های جدیدی موسوم به کیست ثانویه بنمایند. در این راستا ایــــن مطالعه به منظور تعیین تأثیر آنتی ژن های پروتواسکولکس کیست هیداتیک بر پ...
full textMy Resources
Journal title
volume 14 issue 2
pages 14- 20
publication date 2009-09
By following a journal you will be notified via email when a new issue of this journal is published.
No Keywords
Hosted on Doprax cloud platform doprax.com
copyright © 2015-2023